Contribution à la caractérisation d'une α-amylase produite par une souche levurienne isolée à partir d'un milieu extrême

Abstract

Cette étude vise à produire et caractériser une enzyme amylolytique (α-amylase) secrétée par des levures isolées à partir du sol saharien algérien (Sidi Mastour El-Oued). Cinq souches levuriennes ont été isolées à partir d'échantillon de sol saharien d'El-Oued. Ces dernières, sont sélectionnées sur un milieu PDA à 4 % d'amidon. Les résultats ont montré que 3 souches seulement ont donné des zones d'hydrolyse. L'étude des caractéristiques morphologiques, physiologiques et biochimiques révèle que ces trois souches appartiennent à l'espèce: Candida glabrata (S2), Rhodotorula mucilaginosa (S3) et Candida lusitaniea (S5). Par sa richesse en sucre totaux (25.17 %), le sirop de datte est considéré comme milieu favorable à la survie des levures amylolytiques. L'étude cinétique de la production de l'α- amylase est réalisée en batch dans des flacons en verre de 200 ml contenant 50 ml de milieu de base (température de 30 °C et pH 5). Dans ces conditions, on a obtenu une biomasse de 33.75 g/L et une activité amylasique de 2300 μg/ml/j après 4 jours de fermentation de C. glabrata. Par ailleurs, les profils cinétiques de croissance et de production enzymatique ont montré que la synthèse amylasique est de type associée à la croissance de la levure. L'étude comparative des 3 isolats pour la production des α-amylases a sélectionné C. glabrata, pour leur activité amylolytique élevée par rapport aux autres. La purification partielle de l'α-amylase de C. glabrata par le sulfate d'ammonium (60 %), a donné une activité spécifique d'enzyme de 78.88 U/mg avec une dégrée de purification de 2.73 fois. L'α-amylase partiellement purifié, a un pH optimum de 6 et une température optimale de 55 °C. L'étude cinétique de l'α-amylase de C. glabrata partiellement purifiée a donné une Vmax de (1016.26 μg/ml) et un Km de (0,27 mg/ml).